测序仪之醋酸钠/乙醇法纯化pcr产物
北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年,是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司,我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等,公司尤其在 abi 各种型号的基因分析仪方面有丰富的维修维护经验。
(1) 将混合物离心,将扩增产物转移到1.5ml ep管中。(2) 加入25μl醋酸钠/乙醇混合液,充分振荡,置冰上10min以沉淀dna。12 000r/min于4℃离心30 min,小心弃上清。(3) 加70%(v/v)的乙醇50μl洗涤沉淀2次。12 000r/min于4℃离心5min,小心弃上清和管壁的液珠,真空干燥沉淀10~15min。电泳前测序pcr产物的处理(1) 加入12μl的tsr于离心管中,剧烈振荡,让其充分溶解dna沉淀,稍离心。(2) 将溶液转移至盖体分离的0.2ml pcr管中,稍离心。(3) 在pcr仪上进行热变性(95℃ 2min),冰中骤冷,待上机。
北京拓普塞斯生物专注测序仪销售与维修服务,主营产品型号:有373测序仪、377测序仪、310测序仪、3700测序仪和3100测序仪型等dna测序仪。欢迎您致电联系我们获取更多优惠~~~
测序仪
北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年,是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司,我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等,公司尤其在 abi 各种型号的基因分析仪方面有丰富的维修维护经验。
测序仪的测序结果中的高噪音影响是指什么?
我们一般看测序结果中,一个重要的参数是其信噪比,即为有效信号/背景噪音。高噪音影响就是低信噪比。信噪比越低结果越不可靠。
噪音是有2层含义的:狭义上是本底噪音,由系统误差造成;广义上为非目的片段的测序信号。这么说来可能就有两种情况:
1、系统误差造成,系统误差的噪音本身是很低的,如果是这种情况,那就说明信噪比的分母有关:有效信号太低;大多数与样品浓度低,或者样品与引物不匹配有关。总不可能无中生有吧?没有东西,总测不出有效信号吧?
2、非目的片段测序信号造成:这种情况有高有低,算作与信噪比的分母有关。测序就是半个pcr,对应到pcr里就类似扩增特异性差,出现smear条带,难于认清主条带,这样会容易理解点吧?这种情况一般与引物的特异性差和测序模板质量低下有关。
北京拓普塞斯生物专注测序仪销售与维修服务,主营产品型号:有373测序仪、377测序仪、310测序仪、3700测序仪和3100测序仪型等dna测序仪。欢迎您致电联系我们获取更多优惠~~~
测序仪
北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年,是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司,我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等,公司尤其在 abi 各种型号的基因分析仪方面有丰富的维修维护经验。
dna序列测定分手工测序和自动测序,手工测序包括sanger双脱氧链终止法和maxam-gilbert化学降解法。自动化测序实际上已成为当今 dna序列分析的主流。主要型号有373型测序仪、377型测序仪、310型、3700测序仪和3100测序仪型等dna测序仪,其中310型是临床检测实验室中使用最多的一种型号。
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