产品名称 : 过氧化物测试盒 | quantichrom™ peroxide assay kit
分类名称 : 氧化应激测定,代谢产物分析
产品说明
过氧化物(如过氧化氢h2o2)是在氧化应激条件下形成的一种重要的活性氧。过氧化物含量高可能与衰老、哮喘、糖尿病、动脉浆样硬化、白内障、关节炎和神经组织退化等疾病有关。
在科研和药物研发中，方便、直接、自动化的过氧化物含量检测手段是最为理想的。本公司研制的过氧化物检测试剂盒可直接用于生物样品的检测，免除了预处理过程。检测原理是利用试剂中的fe2+ 被样品中的过氧化物氧化为fe3+，并能与二甲酚橙反应生成紫色复合物的特性，在波长540-610nm(585nm)下检测，其颜色深浅程度与样品中过氧化物的含量成正比。通过配方的改良，充分减小了未处理的样品中其它杂质的干扰。
产品特点
灵敏、准确：检测范围在0.4 – 100 μm (14 – 3400 ng/ml)。
简单、高通量：整个测试过程只需加入一种工作试剂并反应30分钟。利用96孔板高通量检测，每天可以测试上千份样本。
适用范围
1． 检测生物样品(如，血清、血浆、尿液、细胞溶液和培养液)中过氧化物含量。
2．适用于药理学研究，检测药物对过氧化物代谢的影响。
试剂盒规格(96孔板供250份测试)
试剂a：1 ml 试剂b：50 ml
标准品：1 ml 3% 双氧水(h2o2)
储藏条件：在室温下运输, 4°c下保存, 保质期为六个月。
注意事项：本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
96孔板检测步骤
样本处理：一些化学成分会干扰检测，在样本准备时要避免接触。这类物质包括：抗坏血酸、乙二胺四乙酸、肝磷脂、二甲基亚砜(>0.02%)，三硝基苯酚(>0.6%)，sds(>0.12%)，氨基丁三醇(>8mm)和乙醇(>0.4%)。
新鲜的样品可以马上用于检测，或在-20°c下保存，不要反复冻融。如果样品出现颗粒，应离心后取上清进行检测。
试剂准备：检测前所有试剂须放置至室温。每孔需工作试剂100 μl，按试剂a：试剂b = 1：100的比例配制足量工作试剂。
1. 标准品：标准品应在检测前现配。在1.5ml 的离心管中混合10 μl 3%的双氧水和990μl 的水。再取混合后的溶液5μl 与1465μl水混合。最终的双氧水的浓度为30 μm(标注“预混合液”)，按下表比例将其稀释。
2. 将稀释后的标准品和样品各取40 μl，放入透明平底96孔板不同孔中。将200 μl工作试剂加入所有标准品孔和样品孔中。
3. 室温下反应30分钟，在585nm(波长范围540-610nm)处读取吸光度。注：若极少数情况下加入试剂后产生沉淀，可将反应液
编号
预混合液+水
体积(μl)
双氧水(μm)
1
100μl+0μl
100
30
2
80μl+20μl
100
24
3
60μl +40μl
100
18
4
40μl+60μl
100
12
5
30μl+70μl
100
9
6
20μl+80μl
100
6
7
10μl+90μl
100
3
8
0μl+100μl
100
0
转入1.5毫升的离心管，14,000rpm离心2分钟，再小心移取200 ml上清液至一干净孔，读od值，乘以1.2校正体积因素。
浓度计算
用标准品od值减去空白对照(水, 8号)od值，以此值对双氧水浓度作图(见标准曲线)。
样品：用样品(od值)减去空白对照(od值)，以此od差值对照标准曲线，得出样品过氧化物的浓度。
单位换算: 1 μm 双氧水相当于34 ng/ml 或 34 ppb
实验必需品(未提供)
吸液用仪器及附件，96孔板和微孔板分析仪。
96孔板测试标准曲线
论文发表
[1]. chi li yu et al (2008). a novel caffeine dehydrogenase in pseudomonas sp. strain cbb1 oxidizes caffeine to trimethyluric acid. j. bacteriol. 190(2):772–776.
[2]. deshmane, s.l. et al (2009). activation of the oxidative stress pathway by hiv-1 vpr leads to induction of hypoxia-inducible factor 1alpha expression. j biol chem. 284(17):11364-11373.
[3]. giao, n.n. et al (2007). water deficit induced pollen ssterility associated with a programmed cell death and oxidative stress in rice anthers. proceedings the 2nd international rice for the future pp202-209.
订购信息
使用说明
产品说明过氧化物(如过氧化氢h2o2)是在氧化应激条件下形成的一种重要的活性氧。过氧化物含量高可能与衰老、哮喘、糖尿病、动脉浆样硬化、白内障、关节炎和神经组织退化等疾病有关。 在科研和药物研发中，方便、直接、自动化的过氧化物含量检测手段是最为理想的。本公司研制的过氧化物检测试剂盒可直接用于生物样品的检测，免除了预处理过程。检测原理是利用试剂中的fe2+ 被样品中的过氧化物氧化为fe3+，并能与二甲酚橙反应生成紫色复合物的特性，在波长540-610nm(585nm)下检测，其颜色深浅程度与样品中过氧化物的含量成正比。通过配方的改良，充分减小了未处理的样品中其它杂质的干扰。
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