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生物切片
生物切片和显微标本制作技术是组织学、胚胎学、生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态
下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即使光线
可透过,也难以辨明。但在经过固定、脱水、透明、包埋等手续后就可把材料切成较薄的片,再用不同的染色方法就可以显示不同细胞组织的形态及其中某些化学成
份含量的变化,就可以在显微镜下清楚地看到其中不同的区域组分状态,生物切片,切片也便于保存,所以是教学和科研中常用的方法。
生物切片标本制作有许多不同的方法,一般可分为非切片法与切片法两大类:非切片法有涂片、铺片、压片、磨片、整装片等;切片法又包括石蜡切片法、火棉胶切片法、冰冻切片法等。
显微标本制作技术虽是生物学中很基本的操作技术,生物切片种类,但由于生物材料的个体差异、化学试剂的多样性,因此操作技术相当细致而复杂,方法也很多,每一步骤的失误都可导致整体的失败,因此需要耐心细致,不断总结经验,才能得到较好的结果。
1、优质生物教学切片将修好的组织包埋石蜡块,固定在已浸蜡的小木块(又称台木)上,生物切片材料,放入夹物部旋紧,校正位置。
2、生物切片将切片刀装入夹刀部旋紧,刀口向上,调整角度。
3、移动刀片固定器,将夹刀部分与夹物部分之间的距离调好,以石蜡块的表面刚贴进刀口为宜。
4、调整石蜡块与刀口间的位置,使石蜡块的两侧与刀口垂直,上下边与刀口平行,若不平行可调节夹物部的螺旋。切硬质材料的蜡块,切片刀应斜置,使刀与被切组织之间有一定的倾角,一般凹度线的平凹面刀以4~6度为宜,双平面刀则需要倾斜15度左右。
5、切片厚度的调节,应将调整厚度的螺旋调到所要求的厚度,微动调节不可在两刻度之间,否则机械易受损伤。
6、切片时右手旋转手轮,左手持毛笔或解剖针,生物切片技术,将连续切下的蜡带平放在预先准备好的黑蜡光纸上。
7、优质生物教学切片使用切片机切取一小张蜡片,放在洁净的载玻片上,加水一滴并倾斜使其流出,将贴在玻片上的蜡片放在解剖镜或显微镜低倍镜下检查,以决定蜡片的取舍。若蜡片中的组织、细胞不符合要求,或其中有空隙、皱褶、破损等,即应弃之。
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